|
|
|
||||||
|
|
|||||||
|
RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES EN POSTER NEUROCIENCIAS III 185. Interferencia de la consolidación de una respuesta de
evitación condicionada por estimulación histaminérgica del
hipocampo ventral en la rata. Edgardo O. Alvarez(1), Arturo M.
Banzan(1). Anteriormente se han presentado evidencias que la histamina en el hipocampo ventral interfiere con la adquisición de una respuesta de evitación condicionada. El objetivo de este trabajo fue evaluar si la imidazolamina, además podría afectar la consolidación de la respuesta. Para ello, se usaron ratas macho adultas implantadas con cánulas de microinyección en el hipocampo ventral. Diferentes grupos se entrenaron en 2 sesiones (8 ensayos c/u) para aprender la evitación de un golpe de corriente en las patas anunciado por un tono de ultrasonido por 30 s. Al finalizar la 2da sesión, los animales se inyectaron con 9 nmol (n=12), 45 nmol (n=10) o 90 nmol de histamina (n=14). 24 h después, en una tercera sesión, se evaluó la latencia de escape y el % de respuestas correctas (% CAR) de las ratas tratadas. Salino se consideró control. Los resultados mostraron que la latencia de escape fue afectada solamente en los primeros ensayos por el tratamiento (31.6±3.2 s Vs 8.2 ±4.2 s; ensayo 2, histamina 9 nmol Vs salino, p<0.01). En cambio, en el % CAR, la estimulación histaminérgica inhibió la evocación en todas las dosis utilizadas a partir del ensayo 2 (33.3±8.8 % Vs 66.7±8.3%, ensayo 3, histamina 9 nmol Vs salina). Los resultados confirman la acción inhibitoria de la histamina y sugieren una acción en la consolidación. 186. Deterioro Cognitivo Leve: valor pronóstico de las
intrusiones en la conversión a demencia tipo Alzheimer (DTA). Paula
Harris(1), Marina Drake(2), Carlos Nagle(1), Ricardo Allegri(1). La producción de intrusiones durante el aprendizaje de una lista de palabras ha sido considerada como un marcador sensible de una demencia tipo Alzheimer (DTA) incipiente. Existen evidencias de que algunos sujetos con deterioro cognitivo leve (DCL) se convierten en dementes (15% anual) y otros no. Objetivos: 1) realizar un seguimiento de los pacientes con DCL con (DCL-1) y sin (DCL-2) intrusiones en la evaluación basal de la memoria episódica; 2) estudiar la tasa de conversión a DTA de cada grupo. Métodología: 30 sujetos con DCL apareados por edad y escolaridad, subdivididos de acuerdo a la presencia (15/30) o ausencia (15/30) de intrusiones durante el aprendizaje de una lista de palabras, fueron estudiados y seguidos durante 1,5 a 2 años. Para observar la evolución durante el seguimiento, se les efectuó una batería neuropsicológica extensa. Resultados: no hubo diferencias significativas en el rendimiento mnésico basal de los pacientes estudiados. La cantidad de sujetos con DCL-1 que evolucionó hacia una DTA (12/15) fue significativamente mayor (p = 0,001) que los que no habían producido este tipo de errores (1/15). Conclusiones: los pacientes con DCL que habían producido intrusiones en los tests de memoria (DCL-1) presentaron una tasa de conversión significativamente mayor que aquellos que no las habían producido (DCL-2). Esto refleja la importancia de las mismas en el examen basal, como valor pronóstico de conversión a DTA. 187. La administración central de Interferon gamma modifica la
actividad del reloj en el hamster dorado. Verónica I. Boggio(1),
Santiago Perez Lloret(1), Patricia O. Castrillón(2), Patricia
Riccio(1), Ana I. Esquifino(2), Daniel P. Cardinali(1), Rodolfo A.
Cutrera(1). El reloj circadiano, ubicado en los núcleos supraquiasmáticos hipotalámicos, regula numerosos ritmos fisiológicos y comportamentales. Su actividad puede ser modificada por estímulos fóticos y no fóticos. Entre los últimos, no se conoce al presente el efecto de la administración central de citoquinas como el interferón gamma (IFNgamma) sobre la actividad. Para ello, hámsters dorados (machos, adultos; n=7 en cada grupo) fueron alojados en jaulas individuales con libre acceso a una rueda bajo un fotoperíodo 14:10 luz-oscuridad. Se inyectó IFNgamma o su solvente (solución salina) a ZT 6 ó 18, tomando por convención a ZT 12 como el comienzo de la noche (período de actividad), a través de una cánula implantada en el tercer ventrículo. La actividad de rueda fue monitoreada continuamente (Dataquest III-Minimitter, Circadia). La administración de IFNgamma a ZT 6 produjo un adelanto en la acrofase del ritmo de 25 minutos con respecto al control junto con una reducción del mesor: 22.51±11.21% y 30.73±7.11% (media ± SEM) a ZT 6 y 18 respectivamente. Además, se observó una reducción en la amplitud, que no alcanzó significación estadística. Respecto de los comienzos de la actividad (onsets), las inyecciones no produjeron ninguna modicación. Esta es la primera vez que se demuestra que una molécula inmunológicamente activa como el IFNgamma es capaz de modificar significativamente la actividad íntima del reloj endógeno, en un animal fotoperiódico como el hámster dorado. 188. Relación entre conductas y niveles de cortisol plasmático
y fecal en monos capuchinos (Cebus apella) en cautiverio. Paula
Harris(1), Mónica Lahoz(2), Ricardo Allegri(1), Carlos Nagle(1). El comportamiento de primates en cautiverio y su relación con niveles de cortisol, ha sido estudiado, hipotetizándose una correlación entre ambos parámetros. Debido a que el primate Cebus apella presenta niveles elevados de cortisol, el objetivo fue determinar si estos correlacionaban con la expresión de comportamientos específicos. Se registraron conductas de 17 monos Cebus apella (7M-10 F, 4 a 28 años) alojados en jaulas individuales en la colonia del CEMIC. Las observaciones se realizaron durante 20 minutos, 3 veces por semana a lo largo de 2 meses. A continuación se tomaron 2 muestras de materia fecal (1 a la mañana antes de la extracción de sangre y 2 a las primeras horas de la tarde del mismo día) y una muestra de sangre. El cortisol en plasma osciló entre 12 y 164 ug/100ml, y entre 1,5 y 56 ug/g en materia fecal. Hubo un incremento mayor al 100% en el cortisol fecal post-extracción de sangre respecto del basal. Las conductas que se expresaron con mayor frecuencia fueron: atención (18,24%) exploración (13,25%) pacing (12,68%) quietud (12,60%) locomoción (12,24%).Excepto la conducta de ‘autoagresión’ (r = 0,65) no se observaron correlaciones significativas entre las demás conductas y los valores de cortisol. A diferencia de otros autores, no encontramos correlación entre los parámetros estudiados.La gran variabilidad en los valores de cortisol, sugiere que éste es sensible a factores como el estado adaptativo y la respuesta de estrés por la extracción de sangre. 189. Desarrollo de un modelo de hipertensión ocular en ratas.
Julieta Campanelli(1), Lucio P. Nahum(1), Jorge L. Benozzi(1), Ruth E.
Rosenstein(1). La matriz extracelular del trabeculado constituida esencialmente por glicosaminoglicanos (GAGs), contribuye significativamente como barrera al pasaje de humor acuoso. Se ha demostrado que el ácido hialurónico (AH) es el GAG más abundante en el trabeculado humano y que la hialuronidasa exógena disminuye la resistencia al flujo acuoso. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un modelo de hipertensión ocular en ratas, a través de la administración intracameral de AH. El AH fue inyectado en un ojo de cada rata, en tanto que el ojo contralateral se inyectó con solución salina. La presión intraocular (PIO) fue determinada mediante un TonoPen XL. Una inyección única de AH (25 microl, 1%) indujo un aumento de la PIO que se mantuvo o largo de 5 días. Aunque luego se observó una caída lenta de este parámetro, la PIO permaneció significativamente elevada hasta el octavo día. La administración crónica (una vez/semana) de AH indujo una elevación persistente de este parámetro que se extendió a lo largo de todo el estudio (10 semanas). La hipertensión inducida por AH fue revertida por diversas terapias anti-glaucomatosas de uso humano frecuente: el timolol, la brimonidina y el latanaprost. Asimismo, hemos demostrado que existen variaciones diarias significativas con un perfil similar en la PIO de ojos controles y tratados con AH. En conjunto, estos resultados demuestran que la administración intracameral crónica de AH podría constituir un nuevo modelo de hipertensión ocular en ratas. 190. Alteraciones visuales en pacientes argentinos tratados con
vigabatrina. Carolina O. Jaliffa(1), Ruth E. Rosenstein(1), Lucio P.
Nahum(1), Silvia Kochen(2), Brenda Giagante(2), Patricia Saidón(2),
Jorge L. Benozzi(1). La Vigabatrina (VGB) es una droga antiepiléptica altamente efectiva que aumenta selectivamente los niveles de ácido g-aminobutírico (GABA) inhibiendo su degradación. En forma reciente se han descripto constricciones del campo visual en pacientes de diversos países tratados con esta droga. Este estudio no se había realizado con anterioridad en nuestro país. El objetivo de este trabajo fue examinar las funciones visuales en 17 pacientes tratados crónicamente con VGB. Cinco pacientes tratados con carbamazepina se utilizaron como control. Los campos visuales fueron realizados por perimetría de 60° (campímetro de Humphrey) y se realizaron electrorretinogramas (ERG) en todos los pacientes. Ninguno de los pacientes refirió síntomas visuales, sin embargo todos ellos mostraron una constricción periférica significativa que no se observó en los controles. Asimismo, en todos los pacientes tratados con VGB se observó una disfunción retiniana bilateral con una marcada alteración electrorretinográfica. En el ERG escotópico se observó una disminución significativa de la amplitud de la onda b mientras que en el ERG fotópico todos sus componentes se encontraron disminuidos. No se observaron diferencias en los potenciales visuales evocados, en la visión de color o en el fondo de ojo. En suma, estos resultados avalan la existencia de una relación causal entre el tratamiento con VGB y un pattern específico de constricción bilateral del campo visual así como una disminución en la onda b del ERG. 191. La exposición de células nerviosas al aluminio (Al)
altera la actividad y expresión de la óxido nítrico sintetasa
(NOS). Carlos A. Lafourcade(1), Graciela Garbossa(1), Claudia Pérez
Leirós(1), Alcira Nesse(1). Se ha sugerido que los efectos neurotóxicos del Al están relacionados con la producción de radicales libres, y, por lo tanto, con el estado rédox de las células. El objetivo de este trabajo es dilucidar la toxicidad del metal asociada a estos mecanismos; para ello nos proponemos estudiar su efecto sobre la NOS, teniendo en cuenta su papel en condiciones fisiológicas y como mediador en la producción de radicales libres. Utilizamos dos modelos experimentales; una línea de neuroblastoma humano (SHSY5Y) cultivadas por 4 días en presencia de cloruro de Al 100 uM, y células del sistema nervioso de ratones (BALB/c machos) obtenidas luego de un máximo de 50 días de administración de citrato de Al 5 mM en el agua de bebida. La expresión de NOS fue estudiada por inmunoblotting y su actividad por la conversión de 14C-arginina a 14C-citrulina. Nuestros resultados muestran una disminución en la actividad de las isoformas constitutivas de NOS inducida por Al (% de inhibición SHSY5Y = 22.6±5.1, n=5; cerebelo: 34.2±5.7, n=5). Por otro lado los ensayos de inmuoblotting muestran cambios en la expresión de la isoforma nNOS tanto en las células de neuroblastomas como en el cerebelo e hipocampo de los ratones tratados con Al, sin cambios en iNOS y eNOS. Teniendo en cuenta estos resultados podemos concluir que el Al induce una disminución en la actividad de la NOS, así como cambios en el patrón de expresión de la nNOS; que podrían contribuir a una acción pro-oxidante del metal. 192. Alteraciones neurológicas estructurales y
ultraestructurales inducidas por la asfixia perinatal. Efecto de la
hipotermia durante la isquemia. Elisa Cebral(1), Francisco Capani(1),
Asia Selvín-Testa(1), Juan J. López-Costa(1), María E. López(1),
César F. Loidl(1), Jorge Pecci-Saavedra(1). La asfixia perinatal (AP) induce alteraciones conductuales y estructurales- bioquímicas en el SNC. Para estudiar los efectos cerebrales de la AP a largo plazo, úteros de rata con fetos a término fueron extraídos y colocados en agua a 37°C durante 19 min. (AP moderada) o 20 min (AP severa). A los 45 días de edad se estudiaron, en neoestriado y corteza cerebral, los cambios en la nNOS (óxido nítrico sintasa neuronal), NF de 200 kD (neurofilamentos) y la GFAP (proteína gliofibrilar ácida), mediante inmunocitoquímica (microscopía óptica (MO) y electrónica (ME). Al MO observamos en los animales asfícticos citomegalia de neuronas nNOS (+) junto con engrosamiento dendrítico. El incremento de inmunotinción para NF 200 kD de los axones y GFAP en las áreas analizadas, en la asfixia severa, sugirió cambios neurodegenerativos e hipertrofia astroglial. Estas alteraciones fueron confirmadas al ME. Los animales tratados con AP en condiciones de hipotermia (20 min AP, 15°C), presentaron inmuno-marcación y ultraestructura similar a los controles. En conclusión, la AP severa induciría cambios neuronales y astrogliales, posiblemente a través de una cascada de eventos en que el exceso de óxido nítrico contribuiría a la inducción de daño cerebral. La AP en condiciones de hipotermia tendría un efecto neuroprotector frente al desencadenamiento de alteraciones cerebrales a largo plazo. 193. El patrón global de actividad cortical modula el potencial
de membrana de las neuronas estriatales. Fernando Kasanetz(1),
Kuei-Yuan Tseng(2), Luis A. Riquelme(1), Mario G. Murer(1). Las neuronas estriatales (NEMs) reciben una fuerte inervacion cortical excitatoria. En ratas anestesiadas, su potencial de membrana (Vm) alterna rítmicamente entre un estado hiperpolarizado y otro despolarizado (ED), durante el cual pueden disparar potenciales de acción. Se ha postulado que la ocurrencia de ED simultáneos en grupos de NEMs habilitaría la transferencia de información cortical a través de los ganglios basales durante la actividad conductual. Sin embargo, hemos demostrado que la fluctuación del Vm de las NEMs está correlacionada con ritmos lentos electrocorticográficos (ECoG) típicos del sueño y la anestesia. Durante la actividad cognitiva el ECoG se encuentra desincronizado (DES). Con el objetivo de estudiar las NEMs durante episodios de DES cortical, realizamos registros simultáneos del ECoG e intracelulares de NEMs en ratas anestesiadas con uretano, en las que el ECoG puede mostrar episodios breves de DES espontánea, o puede ser DES estimulando eléctricamente la región mesopontina. En todas las NEMs estudiadas (n=10), la fluctuación entre estados del Vm fue abolida durante los episodios de DES cortical, pasando el Vm a mostrar ritmos de baja amplitud y alta frecuencia. Estos resultados indican que propiedades de las NEMs que determinan su excitabilidad son fuertemente dependientes del patrón global de actividad ECoG, y sugieren que las hipótesis sobre procesamiento de información aferente por las NEMs durante actos conductuales deben ser revisadas. 194. Los Factores Neurotróficos modifican la captación
neuronal de aminas. María I. Rosón(1), Virginia Chirino(2), Martin
Rodriguez Fermepin(3), Belisario E. Fernández(4). Introducción: los factores neurotróficos (FN) son proteínas endógenas que regulan el desarrollo y mantenimiento de neuronas y células gliales e intervienen en procesos de regeneración del sistema nervioso central (SNC). Asimismo se ha descripto que los FN regulan la plasticidad sináptica. Se describen 4 familias de FN: a) neurotrofinas, b) citoquinas neuropoyéticas, c) factores de crecimiento de fibroblastos y d) de transformación. Objetivo: estudiar los efectos agudos de diferentes FN sobre la neurotransmisión simpática en el SNC. Métodos: se determinó el efecto de FN sobre la captación neuronal de noradrenalina (NA) a los 5 minutos en hipotálamo de rata según la técnica descripta por Vatta y col. (Reg.Pep. 65, 1996). Resultados: los resultados preliminares (dpm/ mg prot ± ES, n=5-10) muestran que el nerve growth factor (NGF) y el glial-derivated neurotrophic factor (GDNF) disminuyeron significativamente (p<0.01) la captación de NA respecto del control (2.56±0.09 vs 3.80±0.18 y 2.64±0.09 vs 3.87±0.20 respectivamente). A su vez, la interleuquina 6 (IL-6) aumentó la captación de NA (p<0.03) respecto del grupo control (4.61±0.10 vs 3.78±0.26). Conclusión: los FN modifican la captación central de aminas pudiendo modular la neurotransmisión noradrenérgica y regular de esta manera la plasticidad sináptica. Los efectos opuestos observados pueden ser atribuidos a los diferentes receptores específicos sobre los que actúan. 195. La Endotelina 1 y 3 (ET-1 y ET-3) modula la liberación de
noradrenalina (NA) en el hipotálamo anterior a través del receptor
ETB y de la vía del óxido nítrico. Andrea S. di Nunzio(1), María
S. Jaureguiberry(1), Liliana G. Bianciotti(2), Marcelo S. Vatta(1). Diversos trabajos muestran que las neuronas catecolaminérgicas hipotalámicas presentan alta densidad de sitios receptores para ETs y una elevada expresión de mRNA. El objetivo del presente trabajo fue determinar los efectos de la ET-1 y ET-3 sobre la liberación neuronal de NA, así como también, los receptores y vías intracelulares involucradas en el hipotálamo anterior de ratas Sprague-Dawley macho (250-300g). Los estudios de liberación de NA se realizaron según Vatta y col. (Regul.Pept.65,175,1996). Anteriormente se demostró que la ET-1 10nM y la ET-3 10nM disminuyen la liberación de neuronal NA en el hipotálamo anterior. La respuesta inducida por ambas ETs en el hipotálamo anterior se bloqueó por el antagonista del receptor ETB, BQ-788 100nM (BQ-788, 0.9±0.05 vs BQ-788+ ET-1, 0.9±0.06 y BQ-788+ET-3, 0.87±0.07). Tanto el L-NAME 10uM, un inhibidor de la óxido nítrico sintasa, como el azul de metileno (MeB) 10uM, un inhibidor de la guanilato ciclasa, bloquearon el efecto inhibitorio de ambas ETs sobre la liberación de NA en el hipotálamo anterior (L-NAME, 0.95±0.07 vs L-NAME+ET-1, 0.99±0.03 y L-NAME+ET-3, 0.94±0.05; MeB, 0.98±0.04 vs MeB+ET-1, 0.97±0.03 y MeB+ET-3, 0.92±0.01).* p<0.05 (ANOVA y ‘t’ test modificado por Bonferroni); n = 5-9. Nuestros resultados demuestran que ambas ETs tienen un efecto neuromodulador inhibitorio sobre la liberación de NA en el hipotálamo anterior, el cual esta mediado por la activación del receptor ETB e involucra a la vía del óxido nítrico. 196. Determinación y caracterización de la enzima
3beta-hidroxiesteroide-deshidrogenasa/isomerasa (3b-HSD) en tejido
nervioso. Héctor Coirini(1), Monique Gouèzou(2), Philippe Liere(2),
Brigitte Delespierre(2), Michael Schumacher(2), Rachida Guennoun(2). Los niveles de progesterona (Prog) en el nervio ciático son mayores que en el plasma y se ha sugerido que esto se debe a una síntesis local de este esteroide. Prog estimula la remielinización del nervio luego de una injuria y se sintetiza por acción de la 3b-HSD a partir de pregnenolona (Preg). Nuestro objetivo fue demostrar la presencia de esta enzima y caracterizar su actividad en el nervio ciático. Se utilizó 3H-Preg como sustrato y NAD+ como cofactor. Los niveles de esteroides formados se calcularon por extrapolación de la relación entre los picos radioactivos, obtenidos por cromatografía en placa delgada o por determinación con espectrometría de masa. Un rápido aumento en la formación de Prog fue observada en homogenatos del tejido dentro de la primera hora de incubación. Se observó una dependencia linear con la concentracion de NAD+; el valor de Km calculado (1.06±0.2 uM) fue similar al descripto para la isoforma Tipo I. El agregado de trilostano, un inhibidor competitivo de esta enzima, provocó una reducción significativa en la formación de Prog (IC50=4.06±2.58uM). Se evaluó el efecto de diferentes esteroides sobre la actividad de la 3b-HSD. Solo estradiol y testosterona produjeron una inhibición significativa en concentraciones similares a la del sustrato (p<0,05). Estos estudios demuestran la presencia de una actividad enzimática productora de esteroides en el nervio, fortaleciendo la hipótesis de una acción local de éstos, en los procesos de regeneración nerviosa.
|
|||||||