MEDICINA - Volumen 58 - Nº 5/2, 1998
MEDICINA (Buenos Aires) 1998

       
       

       
       

RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES ORALES

 

TUMORES IV - HORMONODEPENDENCIA Y TUMORES
Coordinadores: C Lanari, L Colombo

149. Caracterización de un nuevo tumor de mama murino espontáneo hormonodependiente (M05) L Piudo, T Manzur, C Rey Moreno*, C Garcia, S Klein
Área de Investigación, Instituto de Oncología A. H. Roffo, Universidad Nacional de Buenos Aires. *Área Patología Básica, Facultad Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires

M05 es un adenocarcinoma semidiferenciado aparecido espontáneamente en una hembra virgen BALB/c. Crece solo en hembras, con una sobrevida de 120 días y 20% de incidencia metástasica en pulmón. Las células M05 producen GM-CSF y presentan receptores positivos para estrógeno y progesterona. Establecimos la influencia hormonogonadal del huésped sobre el desarrollo tumoral, ovariectomizando (OVX) ratones previo (a) y posterior (b) al transplante del tumor. Se determinó: peso tumoral (P), parámetros hematológicos e histología. El P a los 65 días post-transplante de (a) (0.95±0.18 g) fue menor que el P del control (c) (3.27±0.37 g) p= 0,017. La OVX postransplante (b) detuvo el crecimiento tumoral, siendo el P al final de su evolución (1.63±0.31 g) inferior a (c) p=0,000. El grupo (c) presentó leucocitosis, a expensas de neutrófilos, en función del tamaño tumoral. En los tres grupos los adenocarcinomas MO5 mostró patrones histopatológicos diferentes entre sí. El comportamiento del MO5 es afectado por el estado hormonal del huésped, siendo un modelo tumoral interesante para el estudio de la hormonodependencia del tumor de mama.

 

150. Isoformas de Receptor a Progesterona en tumores mamarios murinos que tienden a la hormono independencia. S Caruso, A Actis, V Dorfman, E Levin
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires

En una presentación anterior determinamos que dos compuestos, MPA (acetato de medroxiprogesterona) y 8-Cl-AMPc, que actúan sobre diferentes vías transduccionales, modificaban el equilibrio de isoformas de receptor a progesterona (RP) en tumores mamarios murinos hormono-dependientes a progesterona (C4-HD). En este trabajo usamos tumores de una sublínea tumoral, que tiende a la independencia hormonal (C4-t-I). El objetivo es establecer si el cambio en el grado de dependencia hormonal se expresa en el perfil de isoformas de RP, determinadas por HPLC de tamiz molecular. En controles sin tratamiento aparece una isoforma de 125 kDa (especie dimérica) y otra de 25 kDa que puede corresponder al meroreceptor. En cambio, en la sublínea C4HD, se observaba un oligómero (>200 kDa) además del dímero. En la sublínea C4-t-I, el tratamiento con MPA y con MPA más 8-Cl-AMPc no modifica el perfil de isoformas control. Con 8-Cl-AMPc solamente, no se observa el pico de 125 kDa y aparece uno de 100 kDa, además del meroreceptor de 25 kDa. En la sublínea C4-HD, el 8-Cl-AMPc no modificaba el perfil control. Conclusión: El pasaje a la hormono independencia en estos tumores murinos está asociado a cambios en el perfil de isoformas de RP y puede afectar el mensaje transcripcional.

 

151. Acción mitogénica de la heregulina en tumores mamarios murinos inducidos por acetato de medroxiprogesterona (MPA) . ME Balañá, EH Charreau, PV Elizalde.
Instituto de Biología y Medicina Experimental, Buenos Aires

Se estudió la participación de la heregulina (HRG) en la proliferación de tumores inducidos por MPA. Resultados previos indicaron que existe una regulación positiva de la expresión de HRG por MPA en el tumor hormono-dependiente C4-HD. El tratamiento con HRG ?1 en concentraciones superiores a 2 ng/ml aumenta significativamente la proliferación de células epiteliales tumorales y es capaz de potenciar el efecto proliferativo del MPA a concentraciones de 20-200 ng/ml (cpm/incubación, C: 403±45, 2 ng/ml; HRG : 1042±205; MPA: 1653±159; MPA +20 ng/ml HRG: 2434±187). Al tratar la células con oligodesoxinucleótidos antisentido (OA) del ARNm de HRG, produce una inhibición significativa (p<0.001) en la incorporación de 3H-timidina respecto de los controles creciendo con o sin MPA 10 nM. El agregado de HRG ?1 revierte el efecto inhibitorio observado en presencia de OA. El tratamiento con oligodesoxinucleótidos scramble (OS), en las mismas condiciones, no produce efecto sobre la proliferación celular (cpm/incubación, C: 1094±120, MPA: 1936±188,OA: 528±23, OS :1082±28, OA+MPA: 631±27, OS+ MPA: 1745±33). El tratamiento con OA produjo una disminución del 62% en la expresión de HRG respecto del control, mientras que no hubo cambios en presencia de OS. Postulamos que la HRG sería un mediador de los efectos proliferativos del MPA .

 

152. Citogenética de líneas celulares de carcinomas mamarios murinos inducidos por progestágenos. Victoria Fabris, Claudia Lanari, Susana Merani.
Instituto de Biología y Medicina Experimentall; Centro de Investigación en Reproducción, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires

Se estudió la citogenética de 3 líneas celulares, dos de ellas originadas a partir de un mismo tumor hormono-dependiente, y otra a partir de un tumor hormono-independiente, ambos con receptores hormonales. Ambos adenocarcinomas se originaron en hembras BALB/c tratadas con acetato de medroxiprogesterona (MPA) y se mantienen por pasajes seriados en ratones tratados o no con MPA respectivamente. Se estudió el número cromosómico a partir de metafases obtenidas de cultivos con tratamiento citogenético convencional para técnicas de bandeo C y G. Las tres líneas resultaron ser poliploides, con número modal de 65 y 68 respectivamente para las derivadas de tumor HD y de 74 para la originada de tumor HI. Se observó además la presencia de marcadores, resultantes de fusiones Robertsonianas. Por medio de bandeo G se identificaron los cromosomas involucrados en dichas fusiones. En las tres líneas se observó como una constante la fusión de los cromosomas 1-y posiblemente 10 y 2 y posiblemente 17. Dos de las líneas presentaron solamente estos dos marcadores. La otra línea presentó las mismas fusiones pero repetidas de 2 a 4 veces. Además se observó la presencia de otros marcadores todavía sin identificar en esta última línea. La presencia de marcadores similares en las 3 líneas sugiere que estos eventos estarían relacionados con su origen etiológico común.

 

153. Isoformas del receptor de progesterona (RP), carcinomas mamarios murinos y hormono-dependencia. Luisa Helguero, Caroline Lamb, Leticia Labriola, Alfredo Molinolo, Claudia Lanari.
Instituto de Biología y Medicina Experimental, Buenos Aires.

Disponemos de 3 líneas de carcinomas mamarios murinos progestágeno-dependientes (PD) y de 6 variantes progestágeno-independientes (PI), todas expresan altos niveles de receptores de estrógenos (RE) y progesterona (RP) Tres de las 6 líneas PI regresionan con antiprogestágenos ( AP )y otra 3 son AP resistentes. El objetivo del trabajo fue estudiar las isoformas del RP en relación con distintos grados de hormono-dependencia. Utilizando la técnica de western blot se caracterizaron las isoformas de al menos 3 tumores distintos de cada línea tumoral ( tumores PD: crecidos en presencia o ausencia de MPA) útero y mama ( control positivo) y músculo ( control negativo). Los tumores PD y PI respondedores a AP mostraron una isoforma B 115 Kda y una A de 83 Kda más intensa, ambas en posición similar a los controles y una tercer banda de 78 Kda presente en 23 / 30 muestras .Se observó una regulación negativa de la expresión de las tres bandas, especialmente la de 78 Kda, en los tumores crecidos con MPA. Las 3 líneas AP resistentes mostraron una banda B débil ó ausente, una única banda en la posición de 78 Kda y ausencia de la A ( p<0.05), con respecto a líneas PI sensibles a AP. Conclusiones: (a) Los carcinomas de mama estudiados presentaron una banda en la posición de 78 kda, ausente de los controles normales, la misma se está caracterizando; (b) la respuesta a antihormonas estaría asociada a la expresión diferencial de la isoforma A.

 

154. Acción de los antiprogestágenos sobre la expresión de proteínas reguladoras del ciclo celular en un adenocarcinoma mamario murino. MG Peters, E Charreau, P Elizalde, M Goin.
Instituto de Biología y Medicina Experimental

El objetivo del trabajo fue correlacionar el efecto inhibitorio del crecimiento tumoral de dos antiprogestágenos de diferente mecanismo de acción, RU486 y ZK98299, con la expresión de moléculas reguladoras del ciclo celular: ciclinas D1, E y A, quinasas dependientes de ciclinas Cdk2 y Cdk4, y el inhibidor de Cdks p21 (WAF1). Se utilizó el adenocarcinoma mamario inducido por MPA C7HI, de histología ductal, progestágeno independiente, y que expresa receptores de estrógeno y progesterona. Dicho tumor sobreexpresa las ciclinas D1 y D3. Ratones hembra de la cepa BALB/c portadores del tumor (20-25mm2) se trataron diariamente con RU486 (5 mg/kg), ZK98299 (10 mg/kg), o permanecieron sin tratar. Se observó una disminución del crecimiento tumoral con ambos antagonistas (Tamaño tumoral, día 14: control: 80 ± 12mm2, RU486: 36 ± 19 mm2, ZK98299: 50 ± 16 mm2). Se prepararon extractos proteicos a partir de los tumores obtenidos luego de 1, 2, 3, 4, 7 y 14 días de tratamiento y de los tumores control, y se realizaron Western blots. A partir de las 24 hs de tratamiento se observó un aumento en la abundancia de p21, siendo máximo a los 4 días (3.3 veces) para retornar a los valores del control a los 7 días. No se observaron cambios en la expresión de las ciclinas D1 y E, ni en las Cdks 2 y 4. Se detectó una significativa disminución de la expresión de la ciclina A en todos los tiempos estudiados. Los resultados sugieren la posible participación de p21 en la inhibición temprana de la proliferación tumoral inducida por RU486 y ZK98299.