MEDICINA - Volumen 58 - Nº 5/2, 1998
MEDICINA (Buenos Aires) 1998

       
     

       
     

RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES ORALES

 

RIÑON I - FISIOLOGIA RENAL

Coordinadores: R Martín, AM Balaszczuk

113. Efecto de la glucosa sobre la captación de dopa en celulas tubulares renales aisladas. Andrea Carranza, Marta Barontini, Ines Armando.
CEDIE-CONICET, Hospital de Niños R. Gutierrez, Buenos Aires

Hemos mostrado previamente que en un modelo de diabetes insulino-dependiente la excreción urinaria de dopamina (DA) esta disminuida con respecto a la de su precursor, la dopa. El objetivo de este trabajo fue determinar, en celulas aisladas de tubulos contorneados proximales renales, el efecto de concentraciones crecientes de glucosa (Glu) en el medio sobre la captación de dopa y la síntesis de DA. Las concentraciones de dopa intracelulares y la producción de DA al medio fueron determinadas por HPLC-ED. En medios con Glu 3.4 mM la captación de l-dopa (100 nM-100 mM) fue dependiente de la concentración. La producción de DA al medio mostró una curva similar. El analisis de las curvas de saturación con dopa mostró dos sitios de transporte: uno de alta afinidad (Vmax 1.20±0.2 pmol/mg prot/min y Km 320±21 nM) y uno de baja afinidad (Vmax 2.45±0.5 pmol/mg prot/min y Km 1530±300 nM). El aumento de Glu en el medio inhibió la captación de dopa. A Glu 18.4 mM, la captación de dopa estaba disminuida 40%. El estudio del efecto de la Glu sobre el sitio de transporte de alta afinidad mostró una disminución en el Vmax sin cambios en el Km. Estos resultados sugieren que la disminución en la producción de DA en animales diabéticos es en parte atribuible a una disminución en la captación del precursor debida al aumento de la concentración luminal de Glu.

 

114. Modificaciones de la presión arterial media (PAM) y la función renal por la administración simultánea de furosemida (F) y L-arginina (L-Arg) en la rata expandida. Laura Bonofiglio, Angeles Costa, Marcela Marchetti, Ana Balaszczuk, Cristina Arranz.
Cátedra de Fisiología, Facultad de Farmacia y Bioquímica UBA; Fundación Barceló. PROSIVAD-CONICET, Buenos Aires

El objetivo fue estudiar los cambios en los efectos de la F al administrarla con L-Arg en la expansión extracelular. Ratas anestesiadas expandidas (10% pc con NaCl 0.9%) tratadas con F (7,5mg/Kg) recibieron L-Arg( 250mg/Kg) o L-NAME (1mg/Kg). Se midió: PAM (mmHg), Diuresis (D:ml/min/100g), Natriuresis (N: mEq/min/ 100g), Kaliuresis (K: mEq/min/100g). En los animales con sobrecarga salina la L-Arg aumenta la D (28.10±6.33 vs 44.26±8.45*) y N (3.72±0.70 vs 12.77±0.15*), respuesta que es revertida por la administración de L-NAME (D:13.14±1.98; N: 3.58±0.75). En este modelo la acción diurética y natriurética de la F se modifica en presencia de L-Arg, evidenciándose un aumento de la D (107.26±8.73 vs 163.34±22.96*), sin cambios en la respuesta excretora de sodio y potasio inducida por la F. La sobrecarga salina no modifica la PAM (88±12 vs 102±2). La L-Arg (73±6) y la F (67±7) la disminuyen significativamente. (*p<0.01). Conclusión: En la expansión extracelular, la acción diurética de la F se potencia con la administración de L-Arg, sin alterar el patrón de excreción de sodio y potasio


115. Mecanismos de adaptación al metabolismo proteico de las nefronas remanentes en ratas con insuficiencia renal crónica (IRC). Elsa Zotta, C Silberstein, P Fiorito, C Ibarra, N Yeyati.
Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Buenos Aires

El aumento de la excreción de urea por nefrona sería uno de los factores que inhiben la retroalimentación túbulo-glomerular determinando la hiperfiltración por nefrona observada en la IRC. El propósito de este estudio es conocer el manejo tubular de urea en el mecanismo de adaptación al metabolismo proteico en ratas con IRC. Se prepararon 3 grupos de ratas: control, con dieta hiperproteica y con IRC. Para inducir la IRC se utilizó el modelo del riñón con 5/6 de nefrectomía. Se observó que la urea plasmática en ratas con IRC aumentó significativamente con respecto a los controles (1,93 ± 0,2 g/l vs 0,21 ± 0,02 g/l, n=4, P<0,01), mientras que descendió en orina (17,19 ± 1,54 g/l vs 26,84 ± 8,7 g/l, n=5). La creatinina en plasma fue mayor en ratas con IRC que en controles (25,46 ± 5,9 mg/dl vs 4,18 ± 0,52 mg/dl, n=5) aunque no mostraron diferencias significativas en orina. Cuando se analizó la excreción fraccional de urea como la relación porcentual entre el clearence de urea y el de creatinina, se observó que en el grupo con IRC superaba el 100%. Este incremento de urea superior al de creatinina podría atribuirse a una secreción de urea a nivel tubular la cual sería responsable del mecanismo de adaptación observado en la IRC.

 

116. Posible mecanismo de acople entre el balance glome-rulotubular (BGT) y el feedback tubuloglomerular (FTG). Paula Díaz Sylvester, M MacLaughlin, C Amorena.
ININCA, Facultad de Medicina UBA y Escuela de Ciencia y Tecnología, UNSAM, Buenos Aires

El endotelio de los capilares peritubulares modula vía óxido nítrico (NO) el proceso de acidificación proximal responsable del 60% de la reabsorción de Na, lo que forma parte del BGT. La tasa de filtrado glomerular oscila por cambios en el NaCl ofertado a mácula densa (FTG). Esto podría afectar la viscosidad (h) de la sangre que sale por la arteriola aferente. Investigamos el rol de h y del NO como nexo entre el BGT y el FTG. En experimentos de micropunción con perfusión tubular proximal y peritubular simultánea, medimos la cinética de acidificación con microelectrodos de pH. El flujo de H+ es igual a JH=(kr/2)(DB) donde DB es la diferencia de base buffer a t=0 y t=¥, k es la constante de acidificación y r es el radio tubular. La h se modificó con dextran (D) y percoll (P) hasta 1.3 veces la h de la solución perfusora control (C). k aumentó con el aumento de h y el efecto fue bloqueado por L-NAME. Los valores de k fueron: C=0.159±0.083; D=0.393±0.044; P=0.291±0.046; D+L-NAME=0.105±0.016. En curvas de acidificación sucesivas en un mismo túbulo k osciló con una frecuencia en torno a 0.033 Hz. Estas variaciones estarían en fase con las oscilaciones en el filtrado debidas al FTG indicando que éste y el BGT podrían estar acoplados a través de un mecanismo que involucra cambios en h y en la liberación de NO.

 

117. Regulación de la Na+,K+-ATPasa (NKA) en segmentos renales por fosfo-defosforilación por PKC y Calcineurina (CN). FR Ibarra, SXJ Cheng, Anita Aperia, Astrid Lindgren
Children’s Hospital, Karolinska Institutet, Sweden; Instituto de Investigaciones Médicas A.Lanari, Universidad Nacional de Buenos Aires

En este trabajo se estudia la regulación de la NKA por PKC y CN en segmentos microdisecados (SM) del nefrón. Se utilizó Western-blot de los SM, con McK1, un Ab que reconoce el sitio Ser23 defosfori- lado, que es el sitio para PKC en la isoforma alfa 1 de la NKA. Valores se expresan en unidades de densidad óptica (DO), X±ESM. En condiciones basales la DO del túbulo proximal (TP) fue menor que en el asa gruesa de Henle (AGH) 2.99±0.61 vs 5.23±0.69, p<0,05. Al inhibir PKC con Ro 8220 10-6M en TP, la señal creció de 2.55±0.71 a 3.58±0.7 p<0,05. Lo mismo ocurrió al tratar al TP con oxymetazolina 10-6M (agonista alfa adrenérgico) la DO varió de 3.3±0.84 a 7.5±0.5 p<0,05. En el ensayo contra tiempo con oxy el pico mayor fue a los 15 min, decreciendo a los 20. El TP mostró un incremento de DO con concentraciones crecientes de Na+ intracelular. En cambio FK506 10-8 M (inhibidor de CN) y Dopamina 10-6 M disminuyeron más del 50% la DO en AGH sin afectar la banda en TP. DA 10-6 M redujo la señal en 30% en TP con [Na+]i altas, 70 mM. El estado basal de fosfo-defosforilación de NKA difiere en TP y AGH. En TP predomina PKC y en AGH CN. El Na+ y las catecolaminas modifican fisiológicamente este equilibrio.

 

118. Diferencia ligada al sexo en la depuración renal de ácido paraaminohipúrico (PAH) en ratas de 365 días. Jorgelina Cerruti*, Adriana M Torres.
Farmacología, Facultad Ciencias Bioquímicas y Farma-cológicas, *Facultad Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de Rosario

Se ha descripto una diferencia ligada al sexo en la depuración de PAH en ratas Wistar adultas (120 días). El objetivo de este trabajo fue determinar si tales diferencias se observan en ratas de mayor edad. Se usaron ratas Wistar de 365 días machos (M) y hembras (H). Se prepararon para técnicas convencionales de clearance (M, n=5; H, n=5). Se determinaron: Velocidad de Filtración Glomerular (ml/min/g): M: 1.28 ± 0.19, H: 1.05 ± 0,19. Clearance renal de PAH (ml/min/g): M: 4.64 ± 0.43, H: 3.37 ± 0.27, p<0.05. Carga Filtrada y Secretada de PAH (µg/min/g) [CFPAH: M: 57 ± 8, H: 62 ± 7; CSPAH: M: 173 ± 23, H: 108 ± 11, p<0.05]. No se observaron diferencias significativas en las excreciones de sodio, potasio y agua. Además, se realizó un estudio farmaco-cinético (M, n=5; H, n=7) luego de una inyección única de PAH (0.3 mg/kg p.c., i.v.). Algunos parámetros obtenidos fueron: Clearance sistémico de PAH (ml/min/100gr): M: 2.74 ± 0.21, H: 2.74 ± 0.07; Constante eliminación (k 10min-1: M: 0.35 ± 0.02, H: 0.31 ± 0.02). Estos datos indicarían que en ratas de 365 días las hembras presentan una menor depuración renal de PAH debida a una disminución en la carga secretada del mismo. Tal diferencia no se observa en el clearance sistémico al contrario de lo descripto para ratas más jóvenes.